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选对蛋白Marker,尽在尊龙凯时

发布时间:2025-08-10   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在生物医疗领域,蛋白Marker被广泛应用于蛋白质电泳和检测,主要分为未预染蛋白Marker和预染蛋白Marker两类。此外,还有其他类型的蛋白Marker,例如显影蛋白Marker等。

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未预染蛋白Marker在电泳过程中无法观察,只有在电泳结束后通过染色才能显示其指示作用。尽管无法实时预示,但由于这些蛋白质没有附带染料分子或标记分子,它们的分子量正好反映了蛋白质的真实大小,因此被认为是最准确的选择。这种Marker通常由几种纯化后的蛋白通过共价耦联与染料混合,能够在电泳过程或转膜时直接观察到。

预染蛋白Marker则可分为单色预染和多色预染。一般来说,Marker条带越多,其参考价值越高,但同时也增加了区分的难度。若采用不同颜色的Marker,辨识就会更加简单;而单色Marker通常通过加倍某些条带的浓度来提示分子量。预染蛋白Marker可以在电泳过程中提供实时指示,当目标蛋白达到最佳分辨区域时,可以及时停止电泳以获取最佳结果。此外,在转膜过程中,预染蛋白Marker也可以用来监测转膜效率,并在膜上标记蛋白分子量。

需要注意的是,预染蛋白Marker与染料共价偶联后,在不同缓冲条件下,其电泳迁移特性可能发生变化,从而导致一定的偏差。这意味着,预染蛋白Marker条带反映的是相对大小,而非绝对大小。

显影蛋白Marker中通常含有IgG结合位点,能够结合检测目的蛋白的一抗或二抗,使该Marker能够与目标条带一起在印迹膜上显现。通常会设置两个预染条带,以便动态观察蛋白质的电泳状态,从而更好地判断转膜效果和方向。结合抗体后,通过化学发光检测可以显示多个条带。

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